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黄曲霉毒素检测方法有哪些

发布日期:2023-07-08

  黄曲霉毒素是由黄曲霉、寄生曲霉和集峰曲霉产生的次生代谢物,目前已知的黄曲霉毒素是AFBl、AFB2、AFB2、AFM1、AFM2、AFP1、AFQ1和AFH1等18种属于该类的毒素。属于有害物质,广泛存在食品中,因此需要对其进行检测,控制含量在允许范围内至关重要。

那么,黄曲霉毒素检测方法有哪些呢?

  1、薄层分析法

  薄层分析法是检测黄曲霉毒素较为经典的方法,也是以前较为常用的方法,至今仍为一些检测机构所用,也是一种国标方法。其原理是针对不同的试样,用适宜的萃取溶剂将黄曲霉毒素从试样中萃取出来,经柱层析净化后,再在薄板上展开后分离。利用黄曲霉毒素的荧光特性,根据荧光斑点的强弱与标准比较确定其含量,对于一些组分很复杂的试样要双向展开,才能获得较高的灵敏度。

  2、液相色谱法

  液相色谱法是近年来发展起来的一种检测方法。其原理是在高效液相色谱仪上添加柱后衍生系统分离,再用荧光检测器测定。与其配套的柱后衍生系统有碘衍生化法、溴衍生化法及较为先进的电化学衍生化法和光化学衍生化法。当前,该方法大多用免疫亲和柱来净化、分离,其净化效果优异。

该法能准确地分离不同种类的黄曲霉毒素,检测速度快且定性与定量准确,检测限低,可作为仲裁法使用,但仪器设备价格昂贵,前处理方法相对繁琐,若用到免疫亲和柱则会使试样检测费用增加,对操作人员的身体健康仍存在一定的危害。

  3、酶联免疫法

  酶联免疫法也是近年来研究开发出来的一种较为新颖的方法。其原理是根据抗体和抗原之间特异性的免疫学反应,较后用测定酶活力的方法来增加测定的灵敏度。

该方法检测速度快、对人体危害小、但重复性差、试剂寿命短、需低温保存、假阳性概率较高、需要配置专门的酶标仪,且对一些富含盐和脂肪的试样需进行额外的处理。

  4、毛细管电泳法

  毛细管电泳法也是一种新发展起来的分析黄曲霉毒素的方法。该方法与激光减弱荧光检测器连用可很好地提高灵敏度。Wei等用毛细管电泳一激光减弱荧光检测器测定AFB1、AFB2、AFG1和AFG1,取得了较为理想的分离效果,其中对AFB2的测定较为灵敏。但毛细管电泳法的成本较高,操作复杂,不适宜在试样检测中广泛应用。

  5、荧光光度法

  荧光光度法也是一种常用的国标方法。该方法的原理是利用各种黄曲霉毒素的荧光特性差异用荧光光度计测定试样中黄曲霉毒素的含量。

  该方法对检测人员身体健康无危害,检测速度迅速,灵敏度高,适用于大量试样检测,且定量准确,但检测费用较高,需要配置专用设备,且不能对单一的毒素进行检测。

  6、生物传感器法

  生物传感器是使用固定化技术将具有分子识别能力的生物活性物质与物理化学换能器结合,可以用来探测生物体内外的环境化学物质或与之起特异性交互作用后产生响应的一种装置。其中利用分子间特异亲和性制备的亲和型生物传感器为免疫传感器口。根据能量转换器所传导的物理或化学信号的不同,免疫传感器又可分为电化学免疫传感器、光学免疫传感器、压电晶体免疫传感器等。由于生物传感器具有选择性高、响应快、操作简单、携带方便和适合于现场检测等优点,因此各国科研工作者正积极探索研制新型生物传感器用于检测黄曲霉毒素。

  7、仪器检测方法

  仪器检测法一般是采用粮食真菌毒素检测仪,该仪器更加适合现代粮食安全普查,检测样品涵盖粮食、食用油、调味品、饲料等;样品处理简单,检测速度快,检测项目包括检测项目:黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、伏马毒素、T2毒素、黄曲霉毒素M1 。粮食真菌毒素快速检测仪适用于各类畜牧养殖企业、谷物生产企业、面粉厂、方便面厂、第三方检测机构及各政府监管部门。

 

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